El actor y modelo, Justin Chambers, nació 11 de julio de 1970 en Springfield, Ohio, EE. UU. Él y su gemelo Jason, son los más pequeños de 5 hermanos. En unas vacaciones fue descubierto por un agente en una estación de metro en París, fue así como comenzó a modelar para marcas como Calvin Klein, Giorgio Armani y muchas otras en Europa, Japón y  Estados Unidos.

En los años 90, se estableció en Nueva York, estudió 4 años en H.B. Studios, gracias a lo cual participó en varias producciones teatrales y en algunos papeles menores de televisión. Su primera oportunidad llegó con la serie Another World (1964) y un año más tarde participó en Cosecha de Fuego y Sombras de Nueva York, más adelante participó en Rose Hill (1997).

Debutó en la pantalla grande con Liberty Heights (1999), a la que le siguieron cintas como El mosquetero (2001), Planes de boda (2001), The Zodiac (2005) y La trama (Broken City) (2013). Ha participado en series como Ciegas de amor (2002) y Swedish Dicks (2017). Uno de sus personajes más conocidos es el Dr. Alex Karev, de la exitosa serie de ABC, Anatomía de Grey (2005) y Anatomía de Grey: equipo-B (2018).