Calista Flockhart  nació el 11 de noviembre de 1964 en Feeport, Illinois. Asistió a la Universidad de Nueva Jersey para estudiar actuación y, en cuanto terminó sus estudios, comenzó a trabajar en una producción de teatro regional en Cleveland. En 1994 obtuvo su primer papel en los escenarios de Broadway: interpretó a Laura en la obra The Glass Menagerie, con la que obtuvo varios reconocimientos e invitaciones a interpretar más papeles en teatro.

Aunque se había resistido a aparecer en televisión, ha sido ahí de donde han salido sus personajes más memorables. En 1997 audicionó para interpretar a Ally McBealy en la serie homónima, obtuvo el papel y una nominación a los Globos de Oro en 1998. Continuó con su carrera en la televisión en la aclamada serie dramática Cinco hermanos, en la que interpretó el papel de Kity Walker. Flockhart ha alternado su carrera en el cine, el teatro y la pantalla chica. En el 2015 se confirmó que aparecería en la nueve serie Supergirl como Cat Grant, serie que ya se encuentra en su cuarta temporada.